日本精品在线,好色男女,久久影院,伊人亚洲综合

PRODUCTS
產(chǎn)品中心
  • ELISA試劑盒
  • 血清
  • 細(xì)胞
  • 質(zhì)粒
  • 標(biāo)準(zhǔn)品
  • PCR基因檢測試劑盒
  • 生化試劑
  • 生化檢測試劑盒
  • 抗體
  • 細(xì)胞系
  • 原代細(xì)胞
  • 細(xì)胞培養(yǎng)基
  • 中藥標(biāo)準(zhǔn)品
  • 技術(shù)文章/ARTICLES

    首頁   >    技術(shù)文章   >   生物制藥領(lǐng)域的不懈探索者

    生物制藥領(lǐng)域的不懈探索者

    點(diǎn)擊次數(shù):898  更新時間:2016-08-15

    HRP分子中與酶活性無關(guān)的糖基被過碘酸鈉氧化為醛基,再與抗體蛋白的氨基形成Schiff堿。為了防止酶蛋白的氨基與醛基發(fā)生自身偶聯(lián),在標(biāo)記前先用2,4-二硝基氟苯(DNFB)封閉酶蛋白中殘留的a-和e-氨基。酶與抗體的結(jié)合反應(yīng)后,再加入硼氫化鈉還原成穩(wěn)定的結(jié)合物。

    (1) 取HRP 5mg溶于0.2mol/L,pH5.6醋酸鹽緩沖液1ml中,加入1%DNFB無水乙醇溶液0.1ml,室溫下輕微攪拌1h;
    (2) 加入新鮮配置的0.1mol/L NaIO4 0.5ml,此時溶液由原棕色變?yōu)槟G色,置4℃放置30min,此時溶液由原棕色變?yōu)槟G色;
    (3) 加入2.5%乙二醇1ml, 室溫下輕微攪拌1h,終止反應(yīng);
    (4) 加入待標(biāo)記的抗體5-10mg, 用1.0mol/L, pH9.5 CBS,調(diào)節(jié)pH值至9.0;
    (5) 混勻,置4℃改良過碘酸鈉標(biāo)記法制備酶標(biāo)抗體
    (6) 加入硼氫化鈉溶液0.1ml,混勻,4℃放置3h;
    (7) 對0.01mol/L,pH7.4 PBS,4℃透析,換液3次;
    (8) 3000r/min離心30min,去除沉淀物;
    (9) 收集上清液即為酶標(biāo)記抗體。

    【注意事項(xiàng)】
    (1) 在氧化HRP時,以pH5.6醋酸鹽緩沖液溶解酶為宜。
    (2) 一般認(rèn)為氧化HRP 5mg, NaIO4量以0.06mol/L 0.5ml為宜,不能低于0.015mol/L 0.5ml。
    (3) 氧化HRP時間以15-30min為宜。
    (4) 加入DNFB的目的是為了封閉酶蛋白中殘留的a-和e-氨基。
    (5) 加入乙二醇的目的是終止反應(yīng);為便于在加入抗體后調(diào)pH值,故乙二醇要用0.05mol/L CBS配制。
    改良過碘酸鈉標(biāo)記法制備酶標(biāo)抗體

    關(guān)注我們:

    © 2024 上海一研生物科技有限公司版權(quán)所有  備案圖標(biāo).png滬ICP備14030958號-14    管理登陸    技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)    GoogleSitemap

    亚洲一线产区和二线产区| 黑人操人妻| 久久偷拍网| 国产bbw| 99久久久无码国产麻豆| 精品国产高清Av自产拍在线| 国自产精品手机在线观看视频| 六月丁香婷婷色狠狠久久| 国产偷国产偷高清精品| 久久久久亚洲精品天堂| 国产伦子系列沙发午睡| 人人妻人人澡av天堂香蕉| 午夜香吻免费观看视频在线播放| 初尝黑人嗷嗷叫中文字幕| 狠狠综合久久久久尤物丿| 国产精华液和欧美的精华液的区别| 亚洲第一极品精品无码久久| 国产成人精品一区二区秒播| 久久精品中文字幕免费| 成人性生交7777| 国产精品一区二区久久| 亚洲一线二线三线suv| 九九九精品视频| 欧美1| 久久欧美高清二区三区| 91色区| 久久99精品久久久久久琪琪| 中国老太性开放| 超碰人人射| av免费网站| 极度另类| 久别的草原在线观看免费直播| 双乳奶水饱满少妇呻吟免费看| 熟女乱论网| 久热精品在线| 高清欧美性猛交xxxx黑人猛交| 97超碰人妻| 国产亚洲精品福利在线无卡一| 免费四影虎ww4hu10| 昆明市| 国产人与动人物a级毛片|